TP01 – Propriétés spectrales des composés
Introduction à la spectrophotométrie : notion de pigment, réalisation de spectres, mesures d’absorbances de solution et de ses dilutions, établissement de la loi de Beer-Lambert. Effets de paramètres physico-chimiques sur les propriétés spectrales d’un pigment
Durée : 3 séances de 3 heures.
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TP02 – Doser un composé coloré à partir d’un étalonnage
Utilisation des solutions de colorants fabriquées durant le TP01 pour déterminer une concentration en colorant dans une solution-test. Introduction à la métrologie.
Durée : 3 heures.
TP03 – Doser un composé non-coloré 01
Dosage des protéines par la réaction de Biuret, avec courbe d’étalonnage.
Durée : 3 heures.
TP04 – Doser un composé non-coloré 02
Dosage des sucres réducteurs par le 3.5 – DNS, avec courbe d’étalonnage. Démonstration de la loi de Beer-Lambert
Durée : 3 heures.
TD01 – Introduction à l’enzymologie
Introduction aux notions de catalyseur, spécificité d’action, rôle de la structure protéique, principe d’étude d’une réaction enzymatique,… Egalement un exercice d’analyse des caractéristiques d’une enzyme, à partir de la base de donnée Uniprot.
Les élèves rédigent leur propre cours à partir du diaporama puis font les exercices, en autonomie.
Durée : 3 heures.
TP05 – Doser un composé non-coloré 03
Mise en oeuvre d’un kit enzymatique de dosage du glucose.
Durée : 3 heures.
TP06 – Doser un composé non-coloré 04
Dosage de l’activité de la phosphatase alcaline dans le lait cru par réaction avec le pNpp.
Note : on croise souvent l’appellation PAL pour la phosphatase alcaline. Elle est incorrecte. La PAL est la phénylalanine ammonia-lyase. La dénomination internationale de la phosphatase alcaline est : APase. Cela peut poser problème en cas de recherche d’information concernant l’enzyme, dans Uniprot ou ailleurs.
Durée : 3 heures
TP07 – Doser un composé non-coloré 05
Dosage de l’activité de la peroxydase par réaction avec le gaïacol. Effets de la température et du pH sur l’activité de l’enzyme.
Durée : 1 séance de manipulation + 1 séance de mutualisation des résultats.
TD02 – Paramètres cinétiques d’une enzyme et effet de l’environnement
Représentation de Menten-Michaelis. Détermination de Km et Vmax. Effet du pH et de la température sur Vmax.
Durée : temps réservé pendant la mutualisation des résultats du TP07.
TD03 – La volumétrie
Introduction au principe de dosage par la volumétrie. Métrologie : règles d’écriture des grandeurs.
Les élèves rédigent leur propre cours à partir du diaporama puis font les exercices, en autonomie.
Durée : 3 heures.
TP08 – Dosage volumétrique d’un acide par une base
Dosage de l’acide acétique du vinaigre par la soude sodique.
Durée : 3 heures.
TP09 – Dosage volumétrique de la vitamine C
Contrôle-qualité du dosage d’un comprimé de vitamine C.
Durée : 3 heures.